in vitro Kultur

Für die Regeneration von Wurzel und Spross ist dabei vor allem das Verhältnis von Auxinen zu Cytokininen entscheidend. Während hohe Auxin- und niedrige Cytokiningehalte die Wurzelbildung fördern, wird durch eine relative Erhöhung der Cytokininkonzentration die Sprossbildung angeregt.
Anwendung findet die Mikrovermehrung in der in vitro Kultur, wenn Arten erbgleich vermehrt werden sollen, bei denen eine Verklonung durch konventionelle vegetative Methoden nur schwer realisierbar ist. Zudem können über die Meristemkultur virusfreie Pflanzen herangezogen werden, da die meristematischen Bereiche einer Pflanze selbst bei einer vorliegenden Infektion häufig nicht befallen sind.
Die in vitro Kultur kann in verschiedene Phasen eingeteilt werden. In der Phase 0 wird die Mutterpflanze ausgewählt und so kultiviert, dass keine endogenen Inhibitoren das Wachstum einschränken. Dies kann z.B. durch die Auswahl des pflanzlichen Materials zur richtigen Jahreszeit erreicht werden, damit die Pflanzen sich nicht einer Ruhephase befinden.

In der Phase 1 wird das Pflanzenmaterial in die sterile in vitro Kultur überführt und dann in der Phase 2 durch das Anheben der Cytokininkonzentration und die damit einhergehende Sprossbildung vermehrt. Die Bewurzelung erfolgt in Phase 3 durch das Anheben der Auxinkonzentration. Anschließend werden die bewurzelten Pflanzen in Phase 4 an die ex vitro Bedingungen gewöhnt.
Neben den Phytohormonen enthalten die Nährmedien der in vitro Kultur alle Makro- und Mikronährstoffe sowie Zucker zur Deckung der Energieversorgung. Darüber hinaus enthalten sie verschiedene Vitamine, die für den Kohlenhydrat- und Stickstoffwechsel benötigt werden und m-Inosit, welches bei der Membranneubildung der Zellen eine wichtige Rolle spielt.